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BioRad伯樂CFX DUET實時熒光定量PCR工作中要遠離哪些儀器?

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伯樂CFX DUET是一款非常精密的光學檢測儀器,為了確保實驗結(jié)果的準確性、穩(wěn)定性和可重復(fù)性,在工作中必須遠離一些可能對其產(chǎn)生干擾的儀器。核心原則是:避免電磁干擾、振動干擾和氣溶膠污染。以下是需要遠離的儀器類別和具體說明:


一、伯樂CFX DUET實時熒光定量PCR儀產(chǎn)生強烈電磁干擾的儀器

這類儀器是qPCR儀的“頭號天敵",因為它們會嚴重干擾qPCR儀內(nèi)部精密的電路、信號傳輸和探測器工作,導(dǎo)致信號不穩(wěn)定、數(shù)據(jù)跳動(曲線毛刺多)甚至儀器故障。1

1、離心機:

(1)危害: 尤其是高速離心機和超速離心機在啟動、加速和停止時會產(chǎn)生巨大的瞬時電流和電磁場。

(2)建議: 不要與qPCR儀共用同一個電路插座或排插。 將離心機放置在遠離qPCR儀的另外一個實驗臺或房間。如果必須在同一房間,保持至少2-3米的距離,并確保電源分開。

2、大功率微波爐/電磁爐:

(1)危害: 工作原理就是強大的電磁場,干擾性強。

(2)建議: 實驗室嚴禁放置此類設(shè)備。如果附近房間有,也需留意。

3、大型制冷設(shè)備:

(1)危害: 如-80°C超低溫冰箱、大型4°C冷藏柜的壓縮機在啟動和運行時會產(chǎn)生電磁干擾和振動。

(2)建議: 盡量不要將qPCR儀緊靠著這些冰箱放置。保持一定距離。

4、渦旋振蕩器、磁力攪拌器:

(1)危害: 雖然功率小,但電機工作也會產(chǎn)生高頻率的電磁干擾。

(2)建議: 不要在qPCR儀正在運行時,在其旁邊使用這些設(shè)備。加樣準備階段可以,但運行時關(guān)閉或移開。

5、其他大型電機設(shè)備:

危害: 如真空泵、搖床、大型水浴鍋等。


二、伯樂CFX DUET實時熒光定量PCR產(chǎn)生強烈振動的儀器

振動會影響qPCR儀內(nèi)部光學元件的精準對位,可能導(dǎo)致熒光信號采集不準,影響Ct值的重復(fù)性。

1、離心機(再次強調(diào)): 離心機,特別是轉(zhuǎn)子不平衡時,會產(chǎn)生巨大振動。

2、搖床/振蕩培養(yǎng)箱: 運行時是持續(xù)的振動源。

3、真空泵: 工作時振動非常明顯。

4、大型空調(diào)或通風系統(tǒng)的外機: 如果安裝在附近,其振動會通過實驗臺面?zhèn)鬟f。

5、建議: 將qPCR儀放置在堅固、平穩(wěn)、獨立的實驗臺面上,遠離這些振動源。必要時可以使用防震臺。


三、伯樂CFX DUET實時熒光定量PCR產(chǎn)生氣溶膠污染的儀器

這是從樣本純度和實驗交叉污染角度考慮。

1、高速離心機:

危害: 在打開離心管蓋的瞬間,極易產(chǎn)生氣溶膠,如果其中含有DNA/RNA模板或PCR產(chǎn)物,會污染您的qPCR反應(yīng)體系,導(dǎo)致假陽性。

建議: 樣本制備區(qū)(尤其是核酸提取和加樣區(qū))必須與qPCR擴增/檢測區(qū)在空間上分開。 qPCR儀應(yīng)該放置在干凈的“擴增區(qū)"或“檢測區(qū)",這個區(qū)域內(nèi)不應(yīng)該進行任何形式的樣本開蓋、核酸提取等操作。

2、渦旋振蕩器:

危害: 劇烈渦旋混合開蓋或管蓋不緊的樣本管時,會產(chǎn)生氣溶膠。

建議: 所有可能產(chǎn)生氣溶膠的操作都應(yīng)在樣本準備區(qū)進行,切勿在qPCR儀旁邊進行。


四、總結(jié)與實踐建議

1、分區(qū)操作是金標準: 嚴格遵守實時熒光定量PCR實驗室的“四區(qū)原則"(試劑準備區(qū)、樣本制備區(qū)、擴增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū))。CFX DUET必須放置在擴增區(qū)。這個區(qū)域應(yīng)該是“干凈"的,只放置qPCR儀和電腦,不進行任何樣本處理。

2、電源: 為CFX DUET配備一個專用的墻壁插座或一個干凈的、不帶任何其他大功率設(shè)備的電源排插。

3、穩(wěn)定的實驗臺面: 將儀器放在平穩(wěn)、無振動的位置。

4、良好的散熱環(huán)境: 周圍預(yù)留空間,遠離熱源,保持通風。

5、保持清潔: 定期清潔樣品槽和外殼,防止灰塵和污染物影響。

簡單來說,請將您的伯樂CFX DUET想象成一位正在聽微弱心跳聲的醫(yī)生。您需要為他創(chuàng)造一個安靜(無電磁干擾)、穩(wěn)定(無振動)、干凈(無污染)且涼爽(散熱良好)的環(huán)境,他才能做出最準確的診斷。

TEL:18016231680

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