艾本德 Eppendorf 5702 R 是一款非常經(jīng)典和可靠的冷凍型微量臺(tái)式高速離心機(jī)。它在分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、生物化學(xué)等實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)用極為廣泛。以下將通過(guò)幾個(gè)典型的使用案例來(lái)詳細(xì)介紹其操作流程、關(guān)鍵技巧和注意事項(xiàng)，幫助您更直觀(guān)地掌握其應(yīng)用。

一、艾本德5702R冷凍離心機(jī)乙醇沉淀后DNA/RNA的回收（常用場(chǎng)景）

1、準(zhǔn)備工作：

將需要離心的 1.5 mL 或 2.0 mL 微量離心管（內(nèi)含核酸與醇的混合液）在室溫平衡片刻，以減少溫差。

確保離心機(jī)已接通電源，制冷系統(tǒng)已開(kāi)啟（建議提前15分鐘開(kāi)機(jī)預(yù)冷）。

準(zhǔn)備適配的轉(zhuǎn)子：例如 FA-45-30-11 轉(zhuǎn)子（用于 2.0/1.5 mL 管，MAX 15,000 rpm）。

2、操作流程：

打開(kāi)蓋子： 按下正面按鈕打開(kāi)離心機(jī)門(mén)。

（1）放置轉(zhuǎn)子與平衡：

檢查轉(zhuǎn)子是否已穩(wěn)妥安裝在電機(jī)軸上。

嚴(yán)格進(jìn)行配平！ 將含有樣品的管子對(duì)稱(chēng)放置。如果樣品數(shù)是單數(shù)，必須用一管裝有等體積水或緩沖液的管子作為平衡管。

確保所有管蓋蓋緊，并且管蓋方向一致（建議管蓋朝外朝向轉(zhuǎn)子中心，以免高速旋轉(zhuǎn)時(shí)蓋子意外彈開(kāi)）。

（2）參數(shù)設(shè)置：

關(guān)閉機(jī)蓋。

在控制面板上設(shè)置：

溫度： +4°C。低溫有助于沉淀，并防止核酸降解（尤其是RNA）。

轉(zhuǎn)速/離心力： ≥ 12,000 rpm 或 ≥ 12,000 xg。

時(shí)間： 15-30分鐘。

按下 “Start" 鍵。儀器會(huì)先加速至設(shè)定轉(zhuǎn)速，并保持溫度。

（3）運(yùn)行結(jié)束

運(yùn)行結(jié)束后會(huì)發(fā)出蜂鳴聲，轉(zhuǎn)子緩慢停止。

等待轉(zhuǎn)子停止后，再按下開(kāi)門(mén)鍵打開(kāi)機(jī)蓋。

小心取出樣品管，輕輕倒掉上清（管底的白色沉淀即為核酸沉淀）。

進(jìn)行后續(xù)的70%乙醇洗滌和干燥步驟。

二、艾本德5702R冷凍離心機(jī)快速收集細(xì)胞或細(xì)菌沉淀

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?將液體培養(yǎng)基中的哺乳動(dòng)物細(xì)胞或細(xì)菌通過(guò)離心快速收集到管底。

1、準(zhǔn)備工作：

樣品為裝有細(xì)胞懸液的 1.5 mL 離心管。

轉(zhuǎn)子同上。

2、操作流程：

平衡并裝載樣品管。

參數(shù)設(shè)置：

溫度： +4°C（保持細(xì)胞活性，防止蛋白降解）或 室溫（對(duì)于細(xì)菌）。

轉(zhuǎn)速/離心力： 根據(jù)樣本類(lèi)型設(shè)定。

真核細(xì)胞： 通常 300 - 500 xg， 5-10分鐘。避免高速破壞細(xì)胞。

大腸桿菌等細(xì)菌： 8,000 - 12,000 xg， 1-2分鐘。

啟動(dòng)離心。

結(jié)束后，可見(jiàn)管底有清晰的細(xì)胞/細(xì)菌沉淀塊，小心吸棄上清。

三、艾本德5702R冷凍離心機(jī)小體積樣品的“瞬離"

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?將PCR管壁或管蓋上的液體甩至管底，或使反應(yīng)體系混合均勻。

1、準(zhǔn)備工作：

使用 PCR 條管或單個(gè) 0.2 mL PCR 管。

更換適配的轉(zhuǎn)子：例如 A-2-DWP 轉(zhuǎn)子（用于 PCR 排管）或帶有適配器的轉(zhuǎn)子。

2、操作流程：

將PCR管放入適配器中并對(duì)稱(chēng)平衡。

參數(shù)設(shè)置：

溫度： 通常設(shè)為 室溫 或直接使用 “Short Spin" 功能（瞬離按鈕）。

轉(zhuǎn)速/離心力： 6,000 - 10,000 rpm。

時(shí)間： 10 - 30秒。時(shí)間極短，因此無(wú)需開(kāi)啟制冷（制冷系統(tǒng)來(lái)不及響應(yīng)）。

按下“Start"鍵，瞬間完成。

立即取出使用。

四、艾本德5702R冷凍離心機(jī)在不同溫度下進(jìn)行蛋白沉淀

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?使用TCA/丙酮等方法沉淀蛋白質(zhì)。

1、準(zhǔn)備工作：

樣品為蛋白溶液與沉淀劑的混合液。

根據(jù)實(shí)驗(yàn)方案要求，可能需要室溫或低溫沉淀。

2、操作流程：

裝載并平衡樣品。

參數(shù)設(shè)置：

方案一（低溫沉淀）： 溫度設(shè)為 +4°C， 轉(zhuǎn)速 14,000 - 15,000 xg， 時(shí)間 15-20分鐘?？商岣叱恋硇?，減少蛋白降解。

方案二（室溫沉淀）： 溫度設(shè)為 +20°C 或關(guān)閉制冷，其他參數(shù)類(lèi)似。

結(jié)束后，小心移除上清，收集蛋白沉淀。

總結(jié)： Eppendorf 5702 R是一款精密儀器，其核心在于 “平衡、合適的轉(zhuǎn)子、正確的溫控和離心參數(shù)" 。通過(guò)上述案例，您可以看到它在幾乎所有涉及微量樣品處理的實(shí)驗(yàn)步驟中都是工具。養(yǎng)成良好的操作習(xí)慣，能極大延長(zhǎng)儀器壽命并保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性。