伯樂(lè)（Bio-Rad）的 Mini-PROTEAN Tetra 小型垂直電泳槽是一款非常經(jīng)典的用于蛋白質(zhì)或核酸（需適配制膠板）SDS-PAGE或Native-PAGE的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備。其標(biāo)準(zhǔn)使用參數(shù)如下：

一、伯樂(lè)Mini-PROTEAN Tetra 小型垂直電泳槽核心規(guī)格

1、制膠板尺寸： 標(biāo)準(zhǔn)板為 10.1 cm x 8.2 cm (H x W)，短板為 7.3 cm x 8.2 cm (H x W)。

2、凝膠數(shù)量： 一次可同時(shí)運(yùn)行 2 塊 凝膠（標(biāo)準(zhǔn)板或短板）。

3、樣品孔數(shù)： 取決于梳子規(guī)格。常用有 10 孔、15 孔 和 厚度的 1.0 mm 或 1.5 mm。

4、10 孔梳： 適合標(biāo)準(zhǔn)上樣量，孔較大。

5、15 孔梳： 適合更多樣品，節(jié)省凝膠，但孔容量較小。

6、上樣量： 與凝膠厚度和梳子有關(guān)。

7、1.0 mm 凝膠，10 孔： 每孔MAX 約 20-25 µL。

8、1.5 mm 凝膠，10 孔： 每孔MAX 約 30-40 µL。

二、伯樂(lè)Mini-PROTEAN Tetra 小型垂直電泳槽標(biāo)準(zhǔn)電泳參數(shù)（以SDS-PAGE為例）

1、凝膠制備（以1.0 mm厚，10%分離膠為例）

（1）分離膠濃度： 根據(jù)目標(biāo)蛋白分子量選擇（通常 8%-15%）。

（2）濃縮膠濃度： 通常為 4% 或 5%。

（3）緩沖系統(tǒng)： 通常使用 Tris-Glycine 緩沖系統(tǒng)（Laemmli系統(tǒng)）。

2、電泳緩沖液（Running Buffer）

（1）常用配方： 25 mM Tris， 192 mM Glycine， 0.1% (w/v) SDS， pH ~8.3。

（2）內(nèi)槽緩沖液用量： 每塊凝膠需要約 125 mL（標(biāo)準(zhǔn)板）或 75 mL（短板）。電泳槽內(nèi)槽總?cè)萘考s為 250 mL。

（3）外槽緩沖液用量： 電泳槽外槽（下槽）總?cè)萘考s為 1.5 L，但運(yùn)行時(shí)通常加入約 800 mL - 1 L 即可覆蓋電極。

3、電泳條件

（1）電壓/電流： 常規(guī)采用 恒定電壓 模式。

（2）濃縮階段（樣品在濃縮膠中）： 80-100 V， 運(yùn)行約 20-30 分鐘，直到染料線進(jìn)入分離膠并成一條直線。

（3）分離階段（樣品在分離膠中）： 120-150 V， 運(yùn)行直至溴酚藍(lán)（前沿指示劑）遷移至凝膠底部（約 60-90 分鐘，取決于凝膠濃度和長(zhǎng)度）。

（4）功率/時(shí)間： 總電泳時(shí)間通常為 1-1.5 小時(shí)。凝膠長(zhǎng)度和電壓會(huì)影響時(shí)間。

（5）短板凝膠： 可以在 150-200 V 下更快完成，約 30-45 分鐘。

（6）溫度控制： 長(zhǎng)時(shí)間高壓電泳會(huì)產(chǎn)生大量熱，建議在 冷室（4°C） 中運(yùn)行或使用 循環(huán)冷卻水系統(tǒng)（Mini-PROTEAN Tetra 電泳槽有配套的冷卻芯），以確保條帶平直并防止蛋白熱變性。

三、關(guān)鍵注意事項(xiàng)

1、組裝： 確保玻璃板、墊片和梳子組裝嚴(yán)密，無(wú)泄漏。制膠架（Casting Frame） 要卡緊。

2、緩沖液量：

內(nèi)槽： 加滿至溢出，確保上下連通且覆蓋上樣孔。

外槽： 液面需淹沒(méi)內(nèi)槽下部的金屬電極/鉑絲。

3、上樣： 樣品需與適量上樣緩沖液混合并煮沸變性（SDS-PAGE）。用微量進(jìn)樣器緩慢加入孔底部，避免沖出。

4、電源連接： 正確連接電極（紅對(duì)紅，黑對(duì)黑），即紅色接頭對(duì)應(yīng)內(nèi)槽（上槽，陰極），黑色接頭對(duì)應(yīng)外槽（下槽，陽(yáng)極）。

5、安全： 電泳開(kāi)始前確認(rèn)蓋好安全蓋。運(yùn)行中勿觸摸緩沖液或打開(kāi)蓋子。

6、清潔： 使用后及時(shí)用去離子水沖洗所有部件，特別是電極和墊圈區(qū)域，防止鹽結(jié)晶腐蝕。

四、對(duì)核酸電泳

1、該電泳槽主要用于蛋白質(zhì)電泳。

2、如需用于DNA/RNA瓊脂糖凝膠電泳，需要額外購(gòu)買專用的制膠托盤和梳子（如Bio-Rad的 #1658008 制膠盤組件）。

3、此時(shí)緩沖液改為 TAE 或 TBE，并采用恒壓模式（如 5-10 V/cm 凝膠長(zhǎng)度）。

五、總結(jié)

1、凝膠類型： 蛋白質(zhì)SDS-PAGE（主流）

2、凝膠尺寸： 標(biāo)準(zhǔn)板（10.1 cm高）或短板（7.3 cm高）

3、運(yùn)行數(shù)量： 2塊

4、上樣量： 1.0mm膠每孔約20-25 µL（10孔梳）

5、緩沖液： Tris-Glycine-SDS，內(nèi)槽~250 mL，外槽~1 L

6、電壓： 濃縮膠 80-100 V，分離膠 120-150 V（標(biāo)準(zhǔn)板）

7、時(shí)間： 1 - 1.5 小時(shí)（標(biāo)準(zhǔn)板）

8、溫度： 建議冷卻條件下運(yùn)行

技術(shù)參數(shù)仍需根據(jù)您的具體實(shí)驗(yàn)條件（如蛋白大小、凝膠濃度、緩沖液新鮮度等）進(jìn)行微調(diào)。使用前參考隨附的說(shuō)明書。